Efecto de la dibucaína sobre la SERCA del músculo pterigoideo interno

Efecto de la dibucaína sobre la SERCA del músculo pterigoideo interno

Drug action of dibucaine on the SERCA from medial pterygoid muscle

Toma, A.

Medina, M. M.

Corti, S.

Sánchez, G. A.

Di Croce, D. E.

Resumen: Objetivo: Determinar el efecto del anestésico local dibucaína sobre las principales isoformas de la SERCA (calcio ATPasa de retículo sarco-endoplásmico) presentes en músculo pterigoideo interno. Métodos: Se aislaron por centrifugación diferencial membranas de retículo sarcoplásmico de pterigoideo interno de conejo neozelandés macho (n=5). Se separaron las isoformas SERCA1a, 2a y 2b por cromatografía de afinidad. Se determinó in vitro la actividad enzimática en presencia de diferentes concentraciones de dibucaína (0-90 mM) por el método de Fiske y Subbarow, realizando 5 experimentos por duplicado y en paralelo para cada isoforma. Se calculó la media y ES de la CI50 (mM) del anestésico para cada isoforma y éstas se compararon por ANOVA de una vía (p<0,05), y prueba Student-Newman-Keuls de comparaciones múltiples. Resultados: Dibucaína inhibió la actividad enzimática en función de su concentración en las tres isoformas en estudio. Las CI50 fueron: SERCA1a 20,02 ± 0,64 mM, SERCA2a 15,03 ± 0,52 mM y SERCA2b 16,00 ± 0,51 mM y resultaron significativamente diferentes (F2,27 = 11,08, p<0,001). La prueba post hoc identificó diferencias significativas entre SERCA1a y 2a, 1a y 2b. El efecto inhibitorio resultó significativamente mayor sobre las isoformas 2a y 2b, cuya presencia es sustancialmente mayor en músculos masticadores. Conclusión: La dibucaína inhibe a la SERCA de pterigoideo interno a concentraciones menores que las usadas en clínica médica (29 mM). Es un anestésico local con potencial efecto miotóxico derivado de la inhibición de la SERCA.

Abstract: Aim: To test the effect of the local anesthetic dibu-caine on the main isoforms of the SERCA (sarco-endosplasmic reticulum calcium-ATPase) in medial pterygoid muscle. Methods: Sarcoplasmic reticulum membranes from male New Zealand rabbits (n=5) were isolated from medial pterygoid muscle by ultracentrifugation. The isoforms SERCA1a, 2a and 2b were separated using high affinity chromatography. In vitro enzymatic activity determinations were performed in the presence of different dibucaine concentrations (0-90 mM) using the colorimetric method described by Fiske & Subbarow. Five assays in duplicate and run in parallel were performed for each of the isoforms. Mean and SEM of the IC50 (mM) for the effect of the anesthetic on each isoform were calcu-lated and compared by one-way ANOVA (p<0.05), and Student-Newman-Keuls multiple comparisons test. Results: Dibucaine inhibited the enzymatic activity in a concentration-dependent manner for the three studied isoforms. The IC50 values were: SERCA1a 20.02 ± 0.64 mM, SERCA2a 15.03 ± 0.52 mM and SER-CA2b 16.00 ± 0.51 mM. The values were significantly different (F2.27 = 11.08, p<0.001). The post hoc test revealed significant differences between SERCA1a and 2a, 1a and 2b. The inhibitory effect was significantly higher on 2a and 2b isoforms, whose presence is substantially higher in masticatory muscles. Conclusion: Dibucaine inhibits SERCA in medial pterygoid muscle at concentrations lower than those used in clinical medicine (29 mM). It is a potentially myotoxic local anesthetic whose toxic effect may derive from SERCA inhibition.

Fil: Toma, A. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología. Cátedra de Biofísica y Bioestadística. Buenos Aires, Argentina.

Fil: Medina, M. M. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología. Cátedra de Biofísica y Bioestadística. Buenos Aires, Argentina.

Fil: Corti, S. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología. Cátedra de Biofísica y Bioestadística. Buenos Aires, Argentina.

Fil: Sánchez, G. A. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología. Cátedra de Biofísica y Bioestadística. Buenos Aires, Argentina.

Fil: Di Croce, D. E. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología. Cátedra de Biofísica y Bioestadística. Buenos Aires, Argentina.

Rev Fac Odontol, Univ Buenos Aires. 2023; 38(88), 71–76.

ISSN 1668-8538

Universidad de Buenos Aires. Facultad de Odontología.

2023

6 pp.